產品分類
Product Category一、試劑盒簡介
EZBioscience microRNA加尾法逆轉錄試劑盒在一步分析中使用了Poly(A)拖尾反應和逆轉錄反應的方法來合成miRNA的第一鏈cDNA。通過使用大腸桿菌聚(A)聚合酶通過添加聚(A)延伸成熟轉錄本的3末端來修飾總RNA中的成熟miRNA。然后,使用Oligo(dT)通用標簽引物對修飾的miRNA進行通用逆轉錄,以合成所有miRNA的第一條鏈cDNA。該試劑盒可與microRNA探針qPCR試劑盒(目錄號:EZB-miProbe/EZB-miProbe-R0/EZB-miProbe-R1/EZB- miProbe-R2)一起使用。
該試劑盒包含三管試劑:gDNA去除劑,miRNART酶混合物和4xmiRNART緩沖液。
其中,gDNA去除劑主要包括濃縮的DNase和緩沖液。它可以降解超過95%的殘留基因組DNA,僅需在室溫(19~27℃)下反應5分鐘即可,從而大大降低了對結果的干擾。
miRNART酶混合物主要包含大腸桿菌Poly(A)聚合酶,逆轉錄酶和RNase抑制劑。大腸桿菌Poly(A)聚合酶不僅具有高效的Poly(A)拖尾反應效率,而且可以特異性識別成熟的單鏈miRNA,從而避免了具有雙銷結構的miRNA前體的逆轉錄反應。具有很強的抗干擾能力和放大能力。
4xmiRNA RTBuffer試劑包含電+Polv(A)拖星反應和逆轉錄反應的所有原材料和引物包括Olipo(dT)
通用標簽引物,緩沖液和dNTPs,并且經過仔細優化以確保Polv(A)高效地進行拖尾反應和逆轉錄反應。
二、產品組分
三、保存條件
-20℃保存
四、EZBioscience microRNA加尾法逆轉錄試劑盒特點
1加尾法一步快速高效率將所有miRNA逆轉錄為可直接檢測的cDNA。
2.無需設計miRNA特異性引物,僅需30分鐘即可完成microRNA的逆轉錄,簡單高效率。
3.需要與EZB-miProbe-Ro.EZB-miProbe,EZB-miProbe-R1EZB-miProbe-R2配套使用。