產品分類
Product Category一、試劑盒簡介
EZBioscience 一步法升級版試劑盒,for microRNA直接用于從培養的細胞裂解物中快速方便地進行逆轉錄。首先在細胞裂解緩沖液中裂解細胞以釋放微小RNA。然后,用gDNA去除劑處理細胞裂解液,以消除污染的基因組DNA。最后,聚腺苷酸化和逆轉錄在同一反應系統中一步完成。
EZBioscience 一步法升級版試劑盒,for microRNA包含6管試劑:細胞裂解緩沖液,gDNA去除劑,miRNART酶混合物,4xmiRNART緩沖液,正向U6引物和通用aPCR反向引物(Universal3'aPCR引物),可用干所有miRNA的定量檢測。因此,aPCR反應僅需要每個靶標miRNA的特異性正向引物。
miRNART酶混合物主要包含大腸桿菌Poly(A)聚合酶,逆轉錄酶和RNase抑制劑。其中,大腸桿菌Poly(A)聚合酶不僅具有添加poly(A)尾部的高效率,而且可以特異性識別單鏈成熟miRNA,從而避免了具有雙鏈結構的miRNA前體的進一步逆轉錄反應。M-MLV突變體逆轉錄酶具有很強的抗干擾能力和擴增能力,并且擴增效率特別好。
4x miRNA RT Buffer包含用干miRNA聚腺苷酸化和逆轉錄反應的所有原材料和引物,包括Oligo(dT)通用標簽引物,緩沖液和dNTPs,并經過精心優化,以確保多腺苷酸化和逆轉錄同時有效地進行。
二、產品組分
三、保存條件 -20℃保存
四、試劑盒特點
無需提取RNA,直接裂解細胞,裂解產物經過一步法快速高效的加尾、逆轉錄得到可用于qPCR檢測的所有 miRNA的cDNA。
30分鐘即可得到針對所有miRNA的cDNA,適用于5000個~50萬細胞的miRNA快速檢測。
后續cDNA僅用于探針法檢測,需要與EZB-miProbe-RO、EZB-miProbe,FZB-miProbe-R1,EZB-miProbe-R2配套使用。