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原代腸癌*培養基

簡要描述:原代腸癌*培養基(Human intestine Carcinoma Cell Medium)是一種為促進人源腸癌原代細胞體外生長而開發的培養基。

  • 產品型號:型號齊全
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2023-07-08
  • 訪  問  量:536
詳情介紹

產品名稱原代腸癌*培養基(Human intestine Carcinoma Cell Medium)
產品說明原代腸癌*培養基Human intestine Carcinoma Cell Medium)是一種為促進人源腸癌原代細胞體外生長而開發的培養基。它是一種無菌的液體混合系統,含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質等。培養基基于碳酸氯鹽的緩沖體系,在5%CO2、37℃培養箱中平衡時,pH值為7.4。該培養基的配方可以提供一個理想人源腸癌原代細胞體外培養環境,選擇性地促進體外人源腸癌原代細胞的生長。

產品優勢
(1) 培養成功率高

(2) 體外持續擴增

(3) 保持腫瘤原始病理特征

(4) 藥敏結果宇臨床數據接近

使用說明:
?使用前準備
1)預冷的DMEM/F12培養基稀釋基質膠(Corning#356231)(50倍稀釋,現配現用),并取適量*覆蓋培養容器,在5%CO2 37℃包被培養容器底部0.5~3h,使用時棄上清。
2)15mL無菌離心管、移液器、移液管、無菌槍頭等表面75%酒精消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min;提前30min從4 ℃冰箱取出*培養基平衡至室溫。
?腸癌原代細胞培
1)至少提前半小時使用稀釋后的基質膠預鋪培養瓶/板,使用前吸棄基質膠,用稀釋液潤洗一遍。
2)將分離并計數后的細胞懸液參考表1中細胞數量接種于培養瓶/板,補加*培養基至所需體積,輕輕搖晃混勻,75%酒精表面消毒后放置培養箱,37℃、5%CO2培養。
3)原代細胞初次接種后2-3天內勿動(利于細胞貼壁),第一次換液建議換半液。

?腸癌原代細胞傳代
1)鏡下觀察細胞形成克隆,且匯合度85~95%時即可傳代。
2)培養箱中取出細胞,棄舊培養液,0.05%胰酶洗滌5秒后吸盡,再加入適量0.05%胰酶,37℃孵育,2~5 min后拿出輕拍培養瓶/板側面,顯微鏡下觀察細胞消化情況。
3)細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用原代細胞終止培養基終止消化,并將細胞轉移至離心管中,1500 rpm, 3min。
4)棄上清,以1~5mL條件培養基重懸細胞,活細胞計數,將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養瓶/板,(不同規格培養瓶/板底面積、接種原代細胞數量、添加滋養細胞數量如表1所示),補加培養基至所需體積,十字交叉混勻,培養容器75%表面消毒后置37℃、5%CO2培養箱培養。其他步驟同上。
注意事項:

  1. 本產品在使用前需平衡至室溫。

  2. 使用產品時應注意無菌操作,避免污染。

  3. 本產品中不含血清,含有原代細胞專用抗生素,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可直接使用。

  4. 樣本需為腫瘤組織,且腫瘤細胞比例越高(>50%),培養成功率越高。

  5. 為保持本產品的理想使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。

  6. 請于保質期內使用本產品,超出保質期,必須放棄使用。

  7. 傳代消化時切記不要消化過度,不宜超過5min,對細胞造成損傷,影響細胞狀態。

  8. 本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。


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