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原代乳腺上皮細胞條件重編程培養基

簡要描述:原代乳腺上皮細胞條件重編程培養基(Human Mammary Epithelial Cell Conditional Reprogramming Medium)是一種為促進乳腺原代細胞體外生長而設計的培養基。

  • 產品型號:型號齊全
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2023-07-08
  • 訪  問  量:658
詳情介紹

產品名稱原代乳腺上皮細胞條件重編程培養基(Human Mammary Epithelial Cell Conditional Reprogramming Medium)
產品說明原代乳腺上皮細胞條件重編程培養基Human Mammary Epithelial Cell Conditional Reprogramming Medium是一種為促進乳腺原代細胞體外生長而設計的培養基。它是一種無菌的液體混合系統,含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質等。該培養基產品基于碳酸氫鹽的緩沖體系,在5%CO2/95%空氣的培養箱中平衡時,pH值為7.4。該培養基的配方可以提供一個理想平衡的營養環境,選擇性地促進體外人乳腺原代細胞的生長,實現體外培養周期短、成本可控、操作便捷的目的。

產品優勢
(1) 培養成功率高

(2) 體外持續擴增

(3) 保持腫瘤原始病理特征

(4) 藥敏結果宇臨床數據接近

使用說明

?使用前準備
(1) y射線照射過的NIH-3T3細胞(40Gy輻照)。
(2)15mL無菌離心管、移液器、移液管、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30min。提前30min從4℃冰箱取出原代細胞培養基平衡至室溫。

?乳腺原代上皮細胞培養
(1)人乳腺組織經消化酶消化后,經100微米篩網過濾后計數,按照表1中的細胞數接種在合適的培養器皿中,加入y 射線輻照后的NIH-3T3細胞(添加滋養細胞數量如表1和表2所示)。
(2)原代細胞初次接種后2-3天勿動(利于細胞貼壁)),培養過程中若培養基顏色變黃但細胞未長滿時可換半液,鏡下觀察細胞未長滿但3T3細胞已不足時,適量補充y射線輻照后的3T3細胞(一般補加初始數目的一半))。

∶以上表格僅供參考。倍增時間>48小時則定義為增殖較慢的細胞∶對干增殖較快細胞.可以綜合倍增時間、接種器皿的規格以及培養周期來估算接種的細胞數量。具體實驗需按具體情況對待。
?乳腺原代上皮傳代
(1)鏡下觀察細胞形成克隆,且匯合度達到80~90%時即可傳代。
(2)培養箱中取出細胞,棄舊培養液,0.25%胰酶洗滌30秒后吸盡,再加入適量TrypLE™ Express (Gibco#12605010),37℃孵育,10-20min后拿出輕拍培養瓶/板側面,顯微鏡下觀察細胞消化情況。
(3)待消化至細胞變圓并開始脫落時用含10%胎牛血清的DMEM培養基終止消化,并將細胞轉移至離心管中, 300g, 5min離心。

(4)棄上清,以1-2mL本細胞培養基產品重懸細胞,活細胞計數,將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養瓶/ 板。
(5)之后,加入丫射線輻照后的NIH-3T3細胞(不同規格培養瓶/板底面積、接種原代細胞數量、添加滋養細胞 數量如表1和表2所示),在培養板/孔中補加乳腺原代上皮細胞培養基至所需體積,輕輕揺晃混勻,表面消毒后置培養箱,37℃、5% CO2條件培養其他步驟同上。
注意事項:

1.本產品在使用前需平衡至室溫。
2.本產品中含有胎牛血清和原代細胞專用抗生素,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可直接使用。
3.為保持本產品的理想使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。
4.請于保質期內使用本產品,超出保質期,必須放棄使用。
5.原代細胞初次接種時會貼壁較慢和貼壁不牢,若無必要,盡量減少取出觀察的次數,建議2-3天一次。
6.傳代消化時切記不要消化過度,對細胞造成損傷,影響細胞狀態。
7.接種細胞時注意細胞密度,不可過稀或過密。
8.使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
9.本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。


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