常見(jiàn)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)原理一文get！

一、細(xì)胞周期檢測(cè)

1.概念

細(xì)胞周期是指細(xì)胞從上一次分裂完成開(kāi)始，到下一次分裂完成時(shí)為止，包括兩個(gè)階段：分裂間期和分裂期。細(xì)胞周期檢測(cè)的是單個(gè)細(xì)胞的增殖速度，通過(guò)縮時(shí)攝影來(lái)測(cè)定。

2.原理

細(xì)胞在不同的時(shí)期，細(xì)胞所含的DNA量不同。正常細(xì)胞的二倍體含量通常為2N，則在G/G1期，細(xì)胞的DNA量為2N，而G2/M期細(xì)胞DNA含量為4N。S期DNA量為2N—4N。碘化丙錠（PI）可以與細(xì)胞內(nèi)的DNA和RNA結(jié)合，通過(guò)RNA酶將RNA消化后，檢測(cè)到與DNA結(jié)合的PI熒光強(qiáng)度可以直接反映細(xì)胞內(nèi)DNA含量的多少。因此，采用流式細(xì)胞術(shù)PI染色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)DNA含量時(shí)，可將細(xì)胞周期分為G/G1期、S期和G2/M期，并通過(guò)特殊軟件計(jì)算各時(shí)相的百分比。  

細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果展示

二、細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)

1. 概念

細(xì)胞克隆，又稱為細(xì)胞集落，指的是單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上，其后代所形成的細(xì)胞群體。細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)的目的是檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力、細(xì)胞侵襲性、對(duì)殺傷因素敏感性等項(xiàng)目的重要技術(shù)方法。

2.原理

接種細(xì)胞后，只有同時(shí)具有貼壁和增殖活力的細(xì)胞才會(huì)形成克隆?？寺⌒纬陕史从臣?xì)胞的獨(dú)立生存能力的強(qiáng)弱，用于評(píng)價(jià)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力。克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系，在進(jìn)行測(cè)定時(shí)需要將接種的單個(gè)細(xì)胞分散為懸液，并直接接種在培養(yǎng)皿中進(jìn)行持續(xù)一周以上的培養(yǎng)，并在此期間進(jìn)行檢查。當(dāng)出現(xiàn)新的、由單個(gè)原始生長(zhǎng)出來(lái)的完整幾何結(jié)構(gòu)時(shí)，則可以停止培養(yǎng)過(guò)程。

細(xì)胞克隆結(jié)果展示

三、細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)

1.概念

細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在一定的生理或病理?xiàng)l件下，受內(nèi)在遺傳機(jī)制控制，按照自身程序主動(dòng)性、生理性的死亡過(guò)程。細(xì)胞凋亡受凋亡相關(guān)基因調(diào)控，故又稱為程序性細(xì)胞死亡。

2.原理

一般而言，細(xì)胞凋亡的早期主要涉及胞內(nèi)一些蛋白質(zhì)的變化，如蛋白質(zhì)量的增加、位置的轉(zhuǎn)移、狀態(tài)的改變等，還有一些磷脂和Ca2+含量的變化；中晚期則伴隨著DNA斷裂和凋亡小體的形成；而整個(gè)凋亡過(guò)程中細(xì)胞形態(tài)也會(huì)發(fā)生改變。

四、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)

1.概念

細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)是將細(xì)胞小室（Transwell小室）放入培養(yǎng)板中，上室（細(xì)胞小室）內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室（培養(yǎng)板）內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜的通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)等的影響。

2.原理

細(xì)胞侵襲指細(xì)胞在原位突破基底膜，然后內(nèi)滲進(jìn)入血管、淋巴管的過(guò)程。

細(xì)胞侵襲結(jié)果展示

五、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)

1. 概念

細(xì)胞遷又稱為細(xì)胞移動(dòng)、細(xì)胞爬行或細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，是指細(xì)胞在接收到遷移信號(hào)或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動(dòng)。

2. 原理

細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)是測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法，類似體外傷口愈合模型。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其他硬物在細(xì)胞生長(zhǎng)的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間，取出細(xì)胞培養(yǎng)板，觀察周邊細(xì)胞是否生長(zhǎng)至中央劃痕區(qū)，以此判斷細(xì)胞的生長(zhǎng)遷移能力，實(shí)驗(yàn)通常需設(shè)定正常對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等組別，通過(guò)不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)的修復(fù)能力，可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力。

細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示

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