WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白酶抑制劑

一、WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白酶抑制劑作用

WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白酶抑制劑主要是在蛋白質(zhì)提取過程中，防止蛋白質(zhì)水解，從而保持蛋白質(zhì)的完整性。在蛋白質(zhì)純化、提取過程中常受到其本身存在的水解酶的影響。在提取蛋白質(zhì)的過程中細(xì)胞破碎釋放出蛋白酶，這些酶在與欲提取的蛋白質(zhì)接觸時(shí)，一旦條件適宜，就會(huì)發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)分解。

二、WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白酶抑制劑的作用原理

蛋白酶抑制劑（protease inhibitor）從廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團(tuán)結(jié)合，使蛋白酶活力下降，甚至消失，但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。

三、WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白酶抑制劑的使用條件

1. 因?yàn)楦鞣N蛋白酶對(duì)不同蛋白質(zhì)的敏感性相同，因此需要調(diào)整各種蛋白酶的濃度。

2. 由于蛋白酶抑制劑在液體中的溶解度極低，應(yīng)注意在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑時(shí)應(yīng)充分混勻，以減少蛋白酶抑制劑的沉淀。

四、常用的蛋白酶抑制劑的分類

1.苯甲基huang酰氟化物( PMSF)

2. 乙二胺四乙酸鈉( EDTA-Na2 )

3.胃蛋白酶抑制劑

4.亮抑蛋白酶肽

5.胰蛋白酶抑制劑

6.抑胃肽

7.胱蛋白酶抑制劑

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