常見(jiàn)緩沖液有什么
實(shí)驗(yàn)室中常常使用的各類溶液種類繁多，且配制方法五花八門(mén)，是否挑花眼了呢?本文總結(jié)了近三十種常用溶液、緩沖液、培養(yǎng)基的配制方法，涵蓋了分子生物學(xué)、蛋白分析、細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)等各個(gè)領(lǐng)域。下面讓我們一起來(lái)看看常見(jiàn)緩沖液有什么吧！
一、蛋白電泳緩沖液
蛋白電泳緩沖液種類非常之多，需要根據(jù)凝膠體系來(lái)進(jìn)行選擇。凝膠系統(tǒng)為T(mén)ris-甘氨酸體系時(shí)，可選擇Tris-甘氨酸電泳緩沖液，凝膠系統(tǒng)為Bis-Tris體系時(shí)，可選擇MES或MOPS緩沖液，當(dāng)凝膠系統(tǒng)為T(mén)ris-tricine體系時(shí)，則選擇Tricine緩沖液。
并且，蛋白電泳緩沖液分為變性與非變性緩沖液，區(qū)別在于變性緩沖液需加入SDS中和電荷。我們通常研究WB、IP時(shí)，使用變性緩沖液研究分子量大小即可，非變性緩沖液常用于研究蛋白空間結(jié)構(gòu)、等電點(diǎn)等。
二、上樣緩沖液
上樣緩沖液(LoadingBuffer)是各類實(shí)驗(yàn)不可少的，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型選擇不同的Buffer，以下展示
DNA電泳LoadingBuffer、RNA電泳LoadingBuffer以及SDS-PAGELoadingBuffer的配制方法。
三、分子雜交常用溶液
分子雜交包含了核酸雜交和蛋白雜交，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，各類常用溶液也是必不少的一環(huán)。使用膜雜交法時(shí)，可選擇Denhardt's溶液，核酸雜交中變性和清洗，可選擇SSC溶液、DNA變性緩沖液。
四、蛋白清洗、轉(zhuǎn)膜常用溶液
蛋白分析的過(guò)程，少不了轉(zhuǎn)膜液、清洗液的參與。WB轉(zhuǎn)膜液用于將印跡從凝膠轉(zhuǎn)印至膜上，TBST緩沖液可以用于WB、IF、IHC等實(shí)驗(yàn)中封閉液、一抗或二抗配制以及抗體孵育后的洗滌，WB封閉液則可用于減少非特異性抗體結(jié)合。TBST緩沖液TBST中含有Tris-HCl，NaCl，tween20這三種物質(zhì)，是做WesternBlotting中常用的一種洗膜緩沖液。目的是洗掉非特異性吸附的蛋白質(zhì)，并且維持一個(gè)接近的天然環(huán)境。
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