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碧云天BCA蛋白濃度測定試劑盒(P0012)產品介紹

 更新時間:2024-02-29 點擊量:322

BCA蛋白濃度測定試劑盒是基于廣泛采用的BCA法開發的,為簡便、穩定、敏感且兼容性強的蛋白濃度檢測提供解決方案。該試劑盒具有高靈敏度,可檢測濃度至25μg/ml,最小檢測量為0.5μg,樣品需1?20μl。

BCA法測定不受絕大部分化學物質干擾,可兼容高達5%的SDS、Triton X-100、Tween 20、60、80。然而,試劑盒對螯合劑和高濃度還原劑敏感,需確保EDTA低于10mM,無EGTA,DTT低于1mM,β?Mercaptoethanol低于0.01%。這些特性確保了準確測定蛋白濃度,并提供可靠的實驗結果。

操作使用:

1.蛋白標準品的準備

a.取1.2ml蛋白標準配制液加入到一管蛋白標準(30mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白標準溶液。配制后可立即使用,也可以-20℃長期保存。

b.取適量25mg/ml蛋白標準,稀釋至終濃度為0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白標準,加入980µl稀釋液即可配制成0.5mg/ml蛋白標準。蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用0.9% NaCl或PBS稀釋標準品。稀釋后的0.5mg/ml蛋白標準可以-20℃長期保存。

2.BCA工作液配制

根據樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。例如5mlBCA試劑A加100μl BCA試劑B,混勻,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室溫24小時內穩定。

3.蛋白濃度測定

a.將標準品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的標準品孔中,加標準品稀釋液補足到20μl,相當于標準品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

b.加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20μl,需加標準品稀釋液補足到20μl。請注意記錄樣品體積。

c.各孔加入200μl BCA工作液,37℃放置20-30分鐘。

注: 也可以室溫放置2小時,或60℃放置30分鐘。BCA法測定蛋白濃度時,顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低,適合在較高溫度孵育,或適當延長孵育時間。

d.用酶標儀測定A562,或540-595nm之間的其他波長的吸光度。

e.根據標準曲線和使用的樣品體積計算出樣品的蛋白濃度。

產品選購:

貨號

產品名稱

規格

P0012

BCA蛋白濃度測定試劑盒

500


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