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培養基中各類添加成分所具有的作用是什么?

 更新時間:2024-02-21 點擊量:198

細胞培養基是供給細胞營養、維持細胞生長和增殖的多種營養物質的混合物,基礎細胞培養基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。人工合成培養基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。培養基中各類添加成分所具有的作用是什么?一起學習下吧!

L-谷氨酰胺 (L-Glutamine)
是細胞培養液體環境中所必需的一種營養成分,是細胞生長的必須氨基酸,為培養的細胞提供重要的能量來源。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。但其在水溶液中不穩定,易降解產生對細胞有害的氨;而氨對于一些細胞具有毒性。

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)

在水溶液中十分穩定,不會自發降解,其被細胞利用的機制為:細胞在培養時會向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐漸水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,這種將低濃度水平的L-谷氨酰胺逐漸釋放到培養液中的過程類似于流加培養策略,可以提高L-谷氨酰胺的利用率,且不會產生多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,細胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L- 谷氨酰胺的添加可能導致延滯期略微延長,其原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間,但不會影響后續培養。

丙酮酸鈉(Sodium pyruvate)

可以作為細胞培養中的替代碳源,在葡萄糖不足的時候,細胞可以代謝丙酮酸鈉,保證細胞更好地生長。

HEPES

是一種常用非離子兩性緩沖液,能有效控制pH在6.8~8.2范圍,尤其在pH7.2~7.4具有較好的緩沖能力。在開放式培養或細胞觀察時能維持較恒定pH值。因此是一種優良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,培養基添加HEPES后能夠較長時間保持恒定的pH范圍,可以有效的防止培養液pH波動較大對細胞生長狀態產生的不利影響。與其他緩沖液如PBS相比,HEPES在維持細胞培養基的pH值方面具有更高的穩定性。

酚紅

酚紅在培養基中被用來作為pH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低pH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的pH值時使培養液呈紫色,pH值7.2~7.4時為紅色,適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類激素 (特別是雌激素)的作用,因此在用到雌激素敏感的細胞時 (如乳腺組織),最好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。

以上就是有關培養基中各類添加成分所具有的作用是什么的問題解答,如果你有更多補充請咨詢百奧創新客服!


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